Comparison of two obturation techniques on adhesion and proliferation of human periodontal ligament fibroblasts / Comparación de la adhesión y proliferación de fibroblastos periodontales humanos en dos técnicas de obturación endodóntica

The present study aimed to compare the adhesion and proliferation of human periodontal ligament fibroblasts (hPDL) in transverse sections of the teeth sealed with two different obturation techniques, BioRoot RCS/hydraulic obturation (HO) and AH-Plus/continuous-wave condensation (CWC). The techniques were tested using an in vitro model to simulate the interaction between periodontal tissues and the materials. The root canals were instrumented and sterilized. A total of 15 samples were obturated with BioRoot RCS/HO and 15 samples with AH-Plus/CWC. Then, roots were sectioned to obtain obturated teeth slices, and hPDL cells were seeded onto the root slices. The results were obtained at intervals of 4 and 24h for cell adhesion; and at 3,7,14, and 21 days for cell proliferation. Empty cell culture plates were use as controls. The cell adhesion was increased at 4 and 24h for both groups, with an increased response observed in the BioRoot RCS/HO group (p<0.05). The difference in cell proliferation was also found between experimental groups. After 14 days of culture, BioRoot RCS/HO group showed an increase response than control and AH-Plus/CWC groups (p<0.05), and after 21 days both groups behaved better than control group, with an increased response observed in the BioRoot RCS/HO group. This study demonstrated that both root canal sealers allow the attach and growth of periodontal ligament fibroblasts, with an increased biological response in the BioRoot RCS/HO group.

El presente estudio se enfocó en comparar la adhesión y proliferación de fibroblastos de ligamento periodontal humano (hPDL) en secciones transversales de raíces previamente obturadas con dos técnicas de obturación diferentes: obturación hidráulica empleando cono único de gutapercha y BioRoot RCS como sellador (HO), y obturación de condensación de onda continua y AH-Plus como sellador (CWC). Los selladores se usaron en un modelo in vitro que simula la interacción entre los tejidos periodontales y los materiales de obturación. Los conductos radiculares fueron instrumentados, esterilizados y obturados. La muestra se compuso de un total de 15 raíces con la técnica BioRoot RCS/HO y 15 raíces con la técnica AH-Plus/CWC. Las células de hPDL fueron sembradas en condiciones estándar de cultivo sobre las raíces seccionadas. Los resultados fueron obtenidos a intervalos de 4 y 24h para adhesión celular, y a los 3,5,7,14 y 21 días de cultivo para proliferación celular. La adhesión celular a las 4 y 24 horas mostró ser diferente para ambas técnicas en comparación con el grupo control, siendo más importante en el grupo BioRoot RCS/HO. La diferencia en la proliferación entre grupos se observó a los 14 días de cultivo, únicamente para el grupo BioRoot RCS/HO; Sin embargo para el día 21 ambas técnicas mostraron mayor proliferación celular que el grupo control, con mejor respuesta para el grupo BioRoot RCS/HO. Este estudio ha demostrado que ambos selladores de conductos permiten la adhesión y crecimiento de fibroblastos de ligamento periodontal, siendo el grupo BioRoot RCS/HO el que mostró mayor biocompatibilidad.

Comportamiento biológico de mallas para la reparación de paredes abdominales. Resultados preliminares en un modelo animal / Biological behavior of meshes used for abdominal wall surgery. Preliminary results in an animal model

Resumen La falla en la reparación de los defectos de la pared abdominal se relaciona con una alteración en la integración del material protésico. El objetivo de este trabajo fue evaluar el comportamiento biológico de mallas utilizadas en cirugía de paredes abdominales en un modelo animal. Luego de la confección de un defecto parietal se colocó una malla intraperitoneal, utilizando 4 grupos de 10 ratas; 1) Prolene (polipropileno microporo de alto peso), 2) Ultrapro (polipropileno + poliglecaprone, macroporo de bajo peso), 3) Proceed (polipropileno + polidoxanona + celulosa oxidada regenerada, macroporo de peso intermedio), y 4) Physiomesh (polipropileno + poliglecaprone, macroporo de bajo peso). Se realizó análisis macroscópico y microscópico a los 30 días y los resultados fueron evaluados por dos observadores independientes. Al examen macroscópico, la integración de la prótesis fue > 75% en todos los grupos. El análisis microscópico mostró mayor inflamación global y número de células gigantes multinucleadas en Prolene (p < 0.01) y menor cantidad de células inflamatorias en la interface músculo-malla en Physiomesh < Ultrapro (p < 0.05). La organización de las fibras de colágeno fue similar para todas las mallas, aunque hubo mayor depósito de colágeno en los espacios inter-filamento para las mallas macroporosas (p < 0.01). Concluimos que las mallas de polipropileno microporo y alto peso producen mayor reacción inflamatoria y de cuerpo extraño. Por lo tanto, las mallas compuestas tendrían una mejor biocompatibilidad y serían mejor toleradas por el huésped.

Abstract An adequate integration of the prosthetic materials used to repair abdominal wall defects is necessary for satisfactory outcomes. We aimed to evaluate, in an animal model, the biological behavior of meshes used for abdominal wall surgery. Four groups of 10 rats were separated. After laparotomy, intraperitoneal prostheses were placed: 1) Prolene (polypropylene microporous, heavy-weight), 2) Ultrapro (polypropylene + poliglecaprone, macroporous low-weight), 3) Proceed (polypropylene + polidoxanone + regenerated oxidized cellulose, microporous medium-weight), 4) Physiomesh (polypropylene + poliglecaprone, macroporous lowweight). Macroscopic and microscopic analyses were performed at 30 days. The results were evaluated by two independent observers and expressed in means with standard deviation. For statistical analysis p < 0.05 was considered significant. On macroscopic examination, mesh integration was greater than 75% in all cases. Microscopic analysis showed greater global inflammation and more multinucleated giant cells in Prolene (p < 0.01). Less inflammatory cells were observed at the muscle-mesh interface in Physiomesh vs. Ultrapro (p < 0.05). Collagen fibers disposition was similar in all meshes, although, microporous meshes had higher collagen deposit in the interfilamentous spaces (p < 0.01). In conclusion, in our animal model, microporous and heavy-weight polypropylene meshes produce greater inflammatory and foreign body reaction. Thus, composite meshes would have greater biocompatibility and better tolerance by the host.

Comportamiento biológico de dos selladores endodónticos biocerámicos en el tejido óseo de la rata. Un ensayo in vivo / Biological behavior of two bioceramic endodontic sealers in the bone tissue of the rat. In vivo study

Objetivo: Analizar cualitativamente la biocompatibilidad y la capacidad osteogénica de dos selladores endodónticos a base de silicato de calcio: el biocerámico Bio-C Sealer (BIOc) y MTA Densell Sealer (MTAd). Materiales y métodos: En la tibia izquierda de 30 ratas Wistar macho se implantó un tubo de silicona obturado con BIOc. De igual forma, en la tibia derecha de cada una se implantó un tubo de silicona obturado con MTAd. Los animales fueron eutanasiados en grupos de 10 a los 7, 30 y 90 días. Las tibias fueron procesadas para su análisis histológico y analizadas con microscopía óptica. Según lo observado, fueron clasificadas en tres categorías: 1: Presencia de cápsula fibrosa sana y neoformación ósea, sin células inflamatorias; 2: Cápsula fibrosa con o sin células inflamatorias, formación inicial de trabéculas óseas y presencia de células inflamatorias en los tejidos circundantes; 3: Ausencia de cápsula y/o tejido óseo y presencia de numerosas células inflamatorias. Los resultados fueron analizados con las pruebas de McNemar y de Kruskal-Wallis (P<0,05). Resultados: A los 7 días, los tejidos en contacto con BIOc y MTAd reaccionaron según la categoría 3. A los 30 días, todos los casos correspondieron a la categoría 2. A los 90 días, los 10 implantes de BIOc fueron clasificados según la categoría 1. MTAd presentó nueve casos de categoría 1 y un caso de categoría 2. No hubo diferencias significativas entre ambos selladores dentro de cada uno de los períodos de observación (P>0,05), pero sí las hubo cuando se compararon los resultados obtenidos entre períodos de observación (P<0,05). Conclusión: Al finalizar el ensayo, Bio-C Sealer y MTA Densell Sealer se comportaron como materiales biocompatibles y osteogénicos en tibias de rata (AU)

Aim: To analyze the biocompatibility and osteogenic capacity of two silicate-based endodontic sealers, the bioceramic Bio C-Sealer (BIOc) and the MTA-based sealer MTA Densell (MTAd). Materials and methods: Silicone tubes filled with BIOc were implanted in the left tibias of 30 white male Wistar rats (one per tibia). In similar fashion, tubes filled with MTAd were implanted in the right tibias. The animals were euthanized in groups of 10 at 7, 30 and 90 days postoperatively. The tibias were removed, processed for histology and analysed under optical microscopy. The observations were classified in three categories: 1: Presence of a healthy fibrous capsule and newly formed bone trabeculae without inflammatory cells. 2: Fibrous capsule with or without inflammatory cells, initial formation of bone trabeculae and presence of inflammatory cells in the surrounding tissues. 3: Absence of a fibrous capsule and/or bone formation with the presence of numerous inflammatory cells. Data was analyzed by the McNemar and the Kruskal-Wallis test (P<0.05). Results: At 7 days: The tissues in contact with BIOc and MTAd reacted as category 3. At 30 days: All cases were classified as category 2. At 90 days: All BIOc cases were in category 1 while MTAd presented nine cases of category 1 and one case of category 2. There were no significant differences (P>0.05) between both sealants BIOc and MTAd in each period group. However, there were significant differences (P<0.05) when the results between periods were compared. Conclusion: At the end of the experiment both, BIOc and MTAd behaved as biocompatible and osteogenic materials in the rats' tibias (AU)

Perspectivas del Uso de la Amalgama Dental bajo el Convenio de Minamata: Tendencias Nacionales e Internacionales / Perspectives of the Use of Dental Amalgam Under the Minamata Convention: National and International Tendencies / Perspectivas para o uso de amálgama dental sob a Convenção de Minamata: tendências nacionais e internacionais

Resumen El objetivo de este artículo de revisión es abordar el tema de la amalgama dental en relación con el Convenido de Minamata Sobre el Mercurio. Las decisiones que, al amparo de dicho convenio, se vienen tomando en el mundo, incluyendo Colombia, y que afectan la continuidad de la amalgama como material de restauración dental, siendo esto agravado por los altos niveles de prevalencia de la caries dental a nivel global. Se revisa la posición de algunas organizaciones internacionales y sus decisiones basadas en lo que la evidencia científica disponible muestra sobre la toxicidad y biocompatibilidad de la amalgama, y sus posibles materiales de reemplazo. Se revisa el panorama nacional y el impacto de las decisiones gubernamentales sobre la profesión odontológica.

Abstract The aim of this review article is to address the issue of dental amalgam in relation to the Minamata Convention on Mercury. The decisions that, under this convention, are being taken in the world, including Colombia, and which affect the continuity of amalgam as dental restoration material, this is being aggravated due to the high levels of prevalence of dental caries globally. The position of some international organizations, their decisions based on the available scientific evidence about the toxicity and biocompatibility of amalgam, and its possible replacement materials are reviewed. The national landscape and the impact of government decisions on the dental profession are reviewed.

Sumário O objetivo deste artigo de revisão é abordar a questão da amálgama dental em relação ao Acordo de Minamata sobre Mercúrio. As decisões que, sob este acordo, estão sendo tomadas no mundo, incluindo a Colômbia, e que afetam a continuidade do amálgama como material de restauração dentária, agravadas pelos altos níveis de prevalência mundial de cárie dentária. A posição de algumas organizações internacionais e suas decisões são revisadas com base no que as evidências científicas disponíveis mostram sobre a toxicidade e biocompatibilidade do amálgama e seus possíveis materiais de substituição. A paisagem nacional e o impacto das decisões do governo na profissão odontológica são revistos.

A comparative study of the biocompatibility of two root-end filling materials in rat connective tissue / Estudio comparativo de la biocompatibilidad de dos materiales de retro-obturación en tejido conectivo de rata

The aim of the present study was to examine the short-term biocompatibility of Endosequence Root Repair Material (ERRM) paste and white Mineral Trioxide Aggregate MTA by implanting them into polyethylene tubes in the subcutaneous connective tissue of rats. twenty five male Wistar rats, 3-4 months old, weighing 300-350 g, were used. The tubes were implanted dorsally into the subcutaneous connective tissues of the rats. Five animals were sacrificed at five examination time points: 1, 3, 5, 7 and 15 days. The connective tissues containing the implants were excised. These sections were studied qualitatively and quantitatively using a light microscope. An average value for each group was obtained by averaging the sum of all inflammatory cells counted in 10 randomly selected, separate areas. For the ERRM group: There was a significant increase in the number of inflammatory cells on days 1-3 and on days 5-7 (P ≤ 0.003 and P ≤ 0.024). In the WHITE MTA group, the mean values of the sum of the inflammatory cells during the periods 1-3 days and 5-7 days were statistically significant (P ≤ 0.001 and P ≤ 0.044, respectively) and the XILOPERCHA group: Difference was observed significant in the value of the sum of inflammatory cells during the period of 3-5 days (P ≤ 0.05). According to the results it can be concluded that both, ERRM as MTA, caused an inflammatory reaction, which decreased over time; suggesting that both materials are biocompatible; showing however the presence of a higher organization of collagen fibers around the implants of ERRM.

El objetivo del presente estudio fue evaluar la biocompatibilidad a corto plazo de Material de Reparación de la Raíz Endodóntica (MRRE) y el agregado de trióxido mineral (AgTM), implantándolos dentro de tubos de polietileno en el tejido conectivo subcutáneo de ratas. Se usaron 25 ratas Wistar macho, de 3-4 meses de edad, con peso de 300 a 350 g. Los tubos fueron implantados en el tejido conectivo subcutáneo del dorso de las ratas. Cinco animales fueron sacrificados en cada uno de los siguientes períodos de tiempo: 1, 3, 5, 7, y 15 días. El tejido conectivo con los implantes fue escindido y seccionado. Los cortes se evaluaron cualitativa y cuantitativamente mediante microscopio óptico. Se obtuvo un valor para cada grupo resultado al promediar la suma de las células inflamatorias contadas en 10 áreas separadas seleccionadas aleatoriamente. Para el grupo de MRRE; hubo un incremento significativo en la cantidad de células inflamatorias entre los días 1-3 y 5-7 (p ≤ 0,003 y p ≤ 0,024). En el grupo de AgTM blanco, los valores promedio de la suma de células inflamatorias entre los períodos 1-3 días, y 5-7 días mostraron ser estadísticamente significativos (p≤ 0,001 y p ≤ 0,044 respectivamente) y en el grupo control de Xilopercha se observó diferencia significativa entre los valores de la suma de células inflamatorias entre los períodos de 3-5 días (P ≤ 0,05). De acuerdo a los resultados, puede concluirse que ambos materiales, AgTM y MRRE causaron una reacción inflamatoria que disminuyó a través del tiempo, sugiriendo que ambos materiales son biocompatibles; mostrando sin embargo una mayor organización de fibras colágenas alrededor de los implantes de MRRE.

Evaluación in Vitro de la Biocompatibilidad de Cuatro Cementos Selladores con Osteoblastos Humanos / In vitro Evaluation of Four Sealer Cements Biocompatibility with Human Osteoblasts

RESUMEN: El correcto sellado apical es un paso importante durante el tratamiento de conductos, para esto, se utilizan puntas de gutapercha y cemento sellador, de este último existen diversas formulaciones químicas en el mercado, por lo cual es importante tomar en cuenta los efectos que estas pueden tener en el proceso de cicatrización periapical. El propósito de este estudio fue evaluar la biocompatibilidad de cuatro cementos selladores con diferente composición química con osteoblastos humanos. Se prepararon extractos de cementos selladores a con dos concentraciones (10 mg/mL y 40 mg/mL) y dos tiempos de exposición (10 min y 8 h), estos fueron colocados en contacto con osteoblastos humanos para evaluar la proliferación y citotoxicidad a 24, 72 y 96 h con sus respectivos controles y blancos. Se realizó un análisis estadístico con ANOVA de un factor y la prueba de comparaciones múltiple de Bonferroni. Los resultados obtenidos, tanto en el ensayo de citotoxicidad como en el de proliferación, indicaron que el cemento a base de resina no es biocompatible con osteoblastos. El cemento a base de poli-dimetilxilosano fue el único que no mostró citotoxicidad a ningún de tiempo de exposición y concentración examinadas en este estudio.

ABSTRACT: Correct apical sealing is an important step during root canal treatment, hence, gutta-percha points and sealant are used. There are several chemical compositions on the market, so it is important to evaluate the effects of these in the periapical healing process. The aim of this study was to evaluate the biocompatibility of four sealer cements with different chemical composition placed in contact with human osteoblast. Different extracts were prepared at two concentrations (10 mg/mL and 40 mg/mL) and two exposure times (10 min and 8 h) these were placed in contact with human osteoblast to evaluate cytotoxicity and proliferation at 24, 48 and 72 h with their respective controls and blanks. A statistical analysis was performed with ANOVA of one factor and Bonferroni post hoc. Results obtained in cytotoxicity and proliferation assays, indicated that the resinbased cement is not biocompatible with osteoblast. The poly-dimethylxilosanbased cement was the only that did not show cytotoxicity at any time of exposure and concentration examined in this study.

Reconstrucción primaria con implantes personalizados después de resección de gran tumoración craneofacial / Primary reconstruction with customized implants after resection of a large craniofacial tumor

Reportamos la reconstrucción inmediata con implantes personalizados en la región craneofacial en una paciente mujer de 22 años con tumoración craneofacial de 12x15 cm en la región fronto orbito cigomático izquierdo que correspondió a fibroma oscificante. Se realizó la reconstrucción con un implante hecho a medida basado en imágenes tomográficas. El implante de polieteretercetona (PEEK) fue seleccionado para reemplazar la pérdida ósea y para restaurar la anatomía facial. No hubo necesidad de ajuste transquirúrgico del implante; ni se presentaron reacciones de rechazo, infección o exposición del implante en el periodo posoperatorio. Aunque el hueso autólogo es preferido para implantes, resulta difícil adecuarlos en situaciones de un compromiso extenso como en el caso presentado; por ello los implantes de PEEK son actualmente una opción en términos de biocompatibilidad, resistencia, duración, conductividad térmica y traslucencia radiográfica.

We report the immediate reconstruction with personalized implants in the craniofacial region in a 22-year old female patient with a craniofacial tumor of 12x15 cm in the left zygomatic orbital frontal region that corresponded to an ossifying fibroma. The reconstruction was performed with a custom-made implant based on tomographic images. The polyetheretherketone (PEEK) implant was selected to replace bone loss and restore facial anatomy. There was no need for transsurgical adjustment of the implant, no rejection, infection or implant exposure in the postoperative period. Although autologous bone is preferred for implants, it is often limited in the morbidity of the donor site, the difficulty of giving shape mainly to the borders and the limitation of the area to be donated; therefore the PEEK implants are currently an option in terms of biocompatibility resistance, duration, thermal conductivity and radiographic translucency.

Síntesis de biomateriales, pruebas de biocompatibilidad in vitro, primeros pasos en ingeniería tisular en Bolivia / Synthesis of biomaterials, in vitro biocompatibility tests, first steps in tissular engineering in Bolivia

El desarrollo de biomateriales bioactivos como andamios para la osteointegración o regeneración de tejidos ha dado grandes pasos, el presente trabajo, muestra los procesos de síntesis de biomateriales como la hidroxiapatita, biomateriales del sistema SiO2-CaO-P2O5-Al2O3 y biovidrios del sistema SiO2.Li2O, se ha logrado caracterizar los biomateriales obtenidos, con resultados similares a los de otros investigadores por técnicas con la Difracción de Rayos X y la Microscopía Electrónica de Barrido, se ha evaluado su comportamientoen pruebas de biocompatibilidad y bioactividad en soluciones de Plasma Rico en Factores de Crecimiento y Fluido corporal simulado, seguidamente y con el fin de evaluar la incorporación de sustancias antibacteriales se ha dopado uno de ellos con plata, logrando determinar que el material tiene esta capacidad, estos resultados son los primeros pasos para encarar posteriores trabajos en el campo de la Ingeniería Tisular en Bolivia, y de esta forma encarar procesos de ostointegración y regeneración de tejidos en general.

The development of bioactive biomaterials as scaffolds for osseointegration or tissue regeneration has taken great steps, the present work shows the synthesis processes of biomaterials such as hydroxyapatite, biomaterials of the SiO2-CaO-P2O5-Al2O3 system and bio-libraries of the SiO2 system. Li2O, it has been possible to characterize the biomaterials obtained, with results similar to those of other researchers by techniques with X-ray Diffraction and Scanning Electron Microscopy, their behavior in biocompatibility and bioactivity tests in Plasma Rico solutions has been evaluated in Growth factors and simulated body fluid, then and in order to evaluate the incorporation of antibacterial substances, one of them has been doped with silver, managing to determine that the material has this capacity, these results are the first steps to face further work in the field of Tissue Engineering in Bolivia, and thus face Osteintegration processes and tissue regeneration in general.

Bicompatibilidad de dos materiales bioactivos en el tejido óseo de la rata / Biocompatibility of two bioactive materials in the bone tissue of the rat

Objetivos: Comparar la biocompatibilidad y la actividadosteogénica del material bioactivo experimental Activa PC y de MTA color blanco, por medio de un modelo de implantación en tibia de rata.Materiales y métodos: En las tibias de 20 (n=20) ratas Wistar macho de aproximadamente 350 gramos, seimplantaron tubos de silicona estériles obturados a ras con Activa PC (Pulpdent Corp., Watertown, Estados Unidos) o MTA (Angelus, Londrina, Brasil). Los animales se separaronen dos grupos de 10 (n=10). La eutanasia de uno de los grupos fue realizada a los 15 días, mientras que la del grupo restante se realizó a los 60 días posimplantación. Las tibiasfueron removidas, se fijaron en formol-buffer al 10 por ciento, y se descalcificaron y procesaron para su estudio histológico. La evaluación fue realizada en base a tres categorías, y los resultados se analizaron por medio de la prueba de Wilcoxon y el test no paramétrico de Mann-Whitney, con un nivel de significación de P0,05) entre Activa PC y MTA Angelus en cada uno de los períodos de observación, pero sí las hubo (P<0,05) cuando se compararon los resultados obtenidosa 15 y 60 días. Conclusiones: Activa PC y MTA Angelus se comportaron como materiales biocompatibles en tibias de rata, y su función bioactiva se incrementó significativamente en función del tiempo transcurrido, favoreciendo ambos materialesel proceso de reparación ósea.

Aplicación del MTA en un caso de restauración endodóntica avanzada por vía directa. Presentación de caso / Direct placement of MTA in a case of advanced endodontic restoration. Case presentation

IIntroducción Las lesiones endoperiodontales son aquellas de carácter inflamatorio que comprometen simultáneamente la pulpa dental y las estructuras del periodonto de inserción, donde se obtiene un pronóstico favorable solo cuando el diente está en un ambiente cerrado y protegido, y se alcanza la cronicidad del componente periodontal de la afección. Para lo cual el uso de los biomateriales y el esquema operatorio tienen un carácter crucial. Objetivo: Describir un caso de restauración endodóntica avanzada por vía directa, con el uso de MTA. Presentación del caso:Paciente de 45 años, masculino, quien acude a consulta presentando una lesión endoperiodontal combinada con toma del fulcron en (46). El mismo requirió una radiculectomía, reconstrucción de corona y raíz por vía directa, y estabilización a través del uso del Agregado Trióxido Mineral (MTA). Conclusiones:La aplicación del MTA en la restauración endodóntica avanzada combinada con el composite nano híbrido por vía directa es una alternativa factible de realizar en una sola visita, y garantiza una rápida recuperación de las funciones buco-dentales del paciente(AU)

Introduction: Endoperiodontal lesions are those lesions that have an inflammatory character that simultaneously compromise the dental pulp and periodontal structures of insertion, where favorable prognosis is obtained only when the tooth is in a closed and protected environment, and the chronicity of the periodontal component is achieved. Consequently, the use of biomaterials and the operative scheme have a crucial character. Objective: To describe a case of advanced endodontic restoration by direct placement of MTA. Case presentation: 45 years old patient who comes to the consultation presenting a combined endoperiodontal lesion, reaching the fulcron in (46). The patient required a radiculectomy, a direct reconstruction of the crown and the root, and stability through the use of Mineral Trioxide Aggregate(MTA). Conclusions: The direct placement of MTA in an advanced endodontic restoration, combined with the nano-hybrid material is an alternative that is viable to do in a single visit and guarantees a fast recovery of the buccal-dental functions of the patient(AU)

Adhesión y proliferación de las células troncales mesenquimales de médula ósea en andamios fibrilares de poli (ácido L-láctico) (PLA) / Adhesion and proliferation of bone marrow mesenchymal stem cells onto poli-L lactic acid (PLA) fiber scaffolds

Resumen: Los andamios fibrilares han recibido un enorme interés como futuros biomateriales con potencial aplicación en el campo de la biomedicina regenerativa. En este sentido, hemos optimizado los parámetros para la síntesis de diferentes concentraciones (6, 7, y 10 %) de andamios de ácido poli-láctico (PLA) por la técnica de hilado por propulsión de gas (AJS). Dichos andamios fueron caracterizados por Microscopía Electrónica de Barrido (SEM) y por espectrometría Infrarroja con Transformada de Fourier (FTIR). Nuestros resultados mostraron que los andamios son fibrilares con diámetros en escalas nanométricas. Asimismo; se estudió la biocompatibilidad celular in vitro al realizar ensayos de adhesión, proliferación y de interacción célula-material al cultivar células troncales mesenquimales derivadas de médula ósea. Nuestros datos indican que las membranas fibrilares de PLA aumentan la respuesta celular, no son citotóxicas al compararse con las películas delgadas de PLA. Por lo tanto; el método de síntesis propuesto tiene potencial para la fabricación de membranas hiladas con una facilidad de procesamiento y podría ser un prometedor biomaterial económico con futuras aplicaciones en la regeneración de tejidos.

Abstract: Fiber scaffolds have received increasing interest as promising biomaterials for potential application in the field of tissue regeneration. In this sense, we optimized the parameters for the synthesis of different concentrations (6, 7, and 10 %) of poly-lactic acid (PLA) scaffolds by air jet spinning technology (AJS). The PLA scaffolds were characterized by Scanning Electron Microscopy (SEM) and Fourier Transform Infrared Spectroscopy (FTIR) analysis. Our results by SEM micrographs showed that scaffolds have a fibrilar morphology with nanoscale diameter of fibers. Biocompatibility assay was observed through an in vitro experiment based on cell attachment, MTT and cell-material interaction assay when culturing bone marrow-derived mesenchymal stem cells onto the PLA spun membrane scaffolds. Our data indicate that fiber membrane of PLA scaffold increase the cellular response, are not cytotoxic when compared to thin films of PLA. Thus; the proposed synthesis method has potential for easy processing of spun fibrilar scaffolds with good biocompatibility and could be a promising economical biomaterial with future potential applications in tissue regeneration.

Respuesta inflamatoria de Bioceramic a la implantación de tubos de dentina en tejido subcutáneo de ratas / Inflammatory response of Bioceramic material to dentin tube implantation in rats' subcutaneous tissue

El propósito fue evaluar la respuesta inflamatoria a la implantación del material Bioceramic en tejido subcutáneo de ratas. Se utilizaron nueve ratas machos Wistar (Rattus norvegicus) a las que les implantaron cuatro tubos de dentina rellenos con cemento sellador Bioceramic y un tubo vacío como grupo control. Se analizaron en tres periodos de tiempo (96 horas, 10 y 21 días). Los animales fueron sacrificados por sobredosis y las muestras obtenidas se procesaron mediante tinción con hematoxilina y eosina para ser analizadas microscópicamente. Los resultados mostraron a las 96 horas inflamación moderada en 75% y severa en 25%. 10 días después disminuyó la inflamación de moderada (67%) a severa (25%). En el periodo final de 21 días se observó inflamación moderada a leve (50%). Se concluye que existió inflamación de moderada a severa en los periodos iniciales, disminuyó a leve en el último periodo. Bioceramic presenta una aceptable respuesta biológica en tejido subcutáneo de ratas.

The aim of the present article was to assess inflammatory response caused by implantation of Bioceramic material in rats' subcutaneous tissue. Nine male Wistar rats were used (Rattus Norvegicus) to which four dentin tubes filled with Bioceramic sealing cement material and one empty tube (control group) were implanted. Results were analyzed in three time periods (96 hours, 10 and 21 days). Animals were sacrificed by anesthetic overdose. Obtained samples were processed by hematoxylin and eosin staining in order to be analyzed with microscope. Results after 96 hours revealed moderate inflammation in 75% of all cases and severe inflammation in 25% of all cases. Ten days later, inflammation decreased from moderate (67%) to mild (25%). At the final period of 21 days, moderate to mild inflammation was observed (50%). It was concluded that there was presence of moderate to severe inflammation at initial periods which decreased to mild inflammation at the final period. «Bioceramic¼ brand material exhibits acceptable biological response in rats' subcutaneous tissues.

Actividad antimicrobiana y biocompatibilidad de los cementos endodónticos a base de hidróxido de calcio / Antimicrobial activity and biocompatibility of calcium hydroxide-based endodontic sealers

Uno de los objetivos de la endodoncia es la eliminación de los microorganismos de la endodoncia es la eliminación de los microorganismos y la prevención de la reinfección en el sistema de conductosradiculares. Una de las fases de la terapia endodóntica que permite laobtención de dichos objetivos es la obturación de los conductos radiculares;esto significa rellenarlos con un material inerte de la manera más hermética posible y un cemento que permita estimular el proceso de reparación apical y periapical. Los microorganismos pueden permanecer en el sistema de conductos radiculares inclusive después de los procesos de instrumentación e irrigación porque pueden presentar una anatomía compleja. En endodoncia, una de las propiedades deseadas en los cementos endodónticos es la acción antimicrobiana, para eliminar las bacterias resistentes. Los cementos a base de hidróxido de calcio son utilizados debido a su acción antimicrobiana y degradación deendotoxinas, entre otras propiedades. Estas premisas nos llevan a larealización de este trabajo, teniendo como objetivo evaluar la actividadantimicrobiana y la biocompatibilidad que presentan los cementos endodónticos a base de hidróxido de calcio a través de una revisión deliteratura. Después de la revisión podemos concluir que los cementosa base de hidróxido de calcio poseen biocompatibilidad y actividad antimicrobiana contra diversos tipos de microorganismos; sin embargo, pueden tener sus propiedades biológicas alteradas dependiendo de la etodología utilizada y del tiempo de aplicación.

One of the aims of endodontics is to eliminate microorganisms and prevent reinfection in the root-canal system. To achieve this, one of the procedures performed in endodontic therapy is the sealing of the root canals. This implies fi lling the root canal with as hermetic an inert material as possible and a sealer that encourages the process of apical and periapical repair. Microorganisms can remain in the root-canal system even after biomechanical preparation and irrigation, as they may have a complex anatomy. In endodontics, one of the desired properties of an endodontic sealer is antimicrobial activity to eliminate resistant bacteria. Calcium hydroxide-based sealers are used due to their antimicrobial activity and role in endotoxin degradation, among other properties. These were the premises that gave rise to this study, which aimed to evaluate the antimicrobial activity and biocompatibil-ity exhibited by a calcium hydroxide-based endodontic sealer based on a review of the literature. As a result of this review, we were able to conclude that while calcium hydroxide-based sealers do display biocompatibility and antimicrobial activity, their biological properties can vary depending on the method used and the time of application.

Reacción del tejido celular subcutáneo de la rata a implantes de conos de Resilon y conos de gutapercha / Reaction of the subcutaneous connective tissue of the rat to Resilon and gutta-percha cones implants

Evaluar la respuesta del tejido celular subcutáneo de la rata a implantes de conos de Resilon (CRE) y conos de gutapercha (CGP). Materiales y métodos: se implantaron en el tejido celular subcutáneo de ratas, conos de CRE y CGP de medidas similares y conicidad .04. La respuesta de los tejidos circundantes se analizó a los 14 y a los 84 días. La reacción a los materiales implantados fue clasificada en cuatro categorías, en función del grado creciente de inflamación y los resultados fueron sometidos a un análisis estadístico. Resultados: a los 14 días, se observó en contacto con CRE y con CGP una cápsula de tejido fibroso joven de poco espesor, vasos de neoformación y áreas ocupadas por escasas células inflamatorias, especialmente linfocitos y plasmocitos. Sólo tres casos de CRE y dos de CGP presentaron un grado de inflamación mayor en los tejidos circundantes. LUego de 84 días, la reacción fue similar para ambos materiales en todos los especímenes. Los conos estaban rodeados por un tejido conectivo fibroso maduro y denso, de mayor espesor, y escasos linfocitos y plasmocitos remanentes en los tejidos circundantes, con la singularidad de que en áreas aisladas y adyacentes a los CGP se observó presencia de partículas aparentemente liberadas por los conos, fagocitadas por macrófagos. Las diferencias entre CRE y CGP, tanto en un mismo período como entre ambos períodos de observación, no fueron significativas (p>0.05). Conclusión: luego de 84 días, los conos de CRE y CGP no se comportaron como materiales totalmente inertes en el tejido celualr subcutáneo de la rata. La persistencia de algunas células inflamatorias en los tejidos circundantes a los CRE y los CGP y la actividad macrofágica estimulada por la presencia de partículas liberadas por los CGP, sugieren evitar en lo posible la sobreobturación con los conos y mantenerlos dentro de los límites del conducto radicular...

Reacción del tejido óseo de la rata a un sellador endodóntico a base de óxido de cinc y eugenol con acetato de hidrocortisona / Response of the bone tissue of the rat to a zin-oxide and eugenol/hydrocortisone acetate-based endodontic sealer

Objetivos: analizar comparativamente la respuesta del tejido óseo de la rat a la implantación de Kleppmethasona (KMS), un sellador endodóntico a base de óxido de cinc y eugenol que contiene un corticoide en su composición y Pulp Canal Sealer EWT (PCS), un sellador a base de óxido de cinc y eugenol convencional. Materiales y métodos: se implantaron en ambas tibias de 12 ratas, tubos de silicona obturados a ras en los dos extremos con una preparación fresca de Kleppmethasona (KMS; Klepp/Raysan SA) o Pulp Canal Sealer (PCS; Sybron-Endo) (control positivo). Como grupo negativo se utilizó la pared lateral de los tuobs de silicona (SCN). Luego de los 14 y 94 días, los implantes fueron removidos, fijados en solución de formol al 10 por ciento y procesados para su estudio histológico. Resultados: a los 14 días posimplantación, el análisis histológico reveló una reacción inflamatoria severa compuesta por polimorfonucleares neutrófilos, linfocitos, plasmocitos, macrófagos, fibroblastos y vasos de neoformación en los especímenes que se hallaban en contgacto directo con KMS y PCS. A los 94 días, en los casos en contacto con KMS, la reacción inflamatoria se redujo sustancialmente y se observó un proceso de reparación con presencia de una cápsula fibrosa sin céluals inflamatorias y el desarrollo de nuevas trabéculas óseas. En los especímenes en contacto con PCS la reacción inflamatoria inicial se redujo, pero se observó la persistencia de algunas células inflamatorias. Sin embargo, esta situación no pareció impedir el desarrollo incipiente de nuevas trabéculas óseas. En contacto con el SCN la reacción de los tejidos a los 14 días fue considerada mínima en un solo caso. Al finalizar la experiencia, los tejidos circundantes se encontraban normales en todos los casos. A los 14 días se observaron diferencias significativas (p<0,05) entre KMS/PCS y los SCN, mientras que no las hubo (p>0,05) entre ambos selladores. A los 94 día...

Reacción del tejido óseo de la rata a un material de obturación de conductos radiculares de tercera generación: un ensayo piloto / Reaction of the rat osseous tissue to a third-generation root canal filling material: a pilot assay

Objetivos: analizar la respuesta del tejido óseo de la rata a la implantación de Licon-D (LND). Material y métodos: se implantaron en tibias de 18 ratas, tubos de silicona obturados con LND o pasta lentamente reabsorbible (PLR) utilizada como control positivo. La pared lateral de los tubos (SCN) fue utilizada como control negativo. A los 7, 30 y 90 días post implantación, los implantes y tejidos circundantes fueron fijados en formol al 10 por ciento y procesados para su estudio histológico. Resultados: 7 días: se observó una reacción inflamatoria severa de los tejidos en contacto con LND y PLR, mientras que en contacto con SCN se observó un tejido conectivo sano, con excepción de dos casos. 30 días: la reacción inflamatoria en contacto con LDN se redujo, observándose un proceso de reparación en progreso con trabéculas óseas incipientes. 90 días: en contacto con LDN se observó una cápsula fibrosa y reparación ósea. Para PLR se observó a los 30 días un tejido fibroso que rodeaba un foco de tejido granulomatoso, mientras que los SCN se encontraban rodeados por una cápsula constituida por tejido fibroso sano. 90 días: en contacto con PLR, se observó una cápsula fibrosa y trabéculas óseas incipientes. En contacto con SCN, los tejidos circudantes se encontraban normales en todos los casos. Conclusiones: a pesar que LND y PLR produjeron una reacción inflamatoria inicial severa, luego de 90 días, ambos materiales fueron bien tolerados por el tejido óseo de la rata. Se observó una reparación completa en contacto con LND y un proceso de reparación en progreso en contacto con PLR.

Biocompatibility of human auricular chondrocytes cultured onto a chitosan/polyvynil alcohol/epichlorohydrin-based hydrogel for tissue engineering application / Biocompatibilidad de condrocitos humanos cultivados sobre un hidrogel a base de quitosano/alcohol polivnílico/epiclorhidrina para aplicación en ingeniería de tejidos

Tissue engineering (TE) has become an alternative for auricular reconstruction based on the combination of cells, molecular signals and biomaterials. Scaffolds are biomaterials that provide structural support for cell attachment and subsequent tissue development. Ideally, a scaffold should have characteristics such as biocompatibility and bioactivity to adequate support cell functions. Our purpose was to evaluate biocompatibility of microtic auricular chondrocytes seeded onto a chitosan-polyvinyl alcohol-epichlorohydrin (CS-PVA-ECH) hydrogel to propose this material as a scaffold for tissue engineering application. After being cultured onto CS-PVA-ECH hydrogels, auricular chondrocytes viability was up to 81%. SEM analysis showed cell attachment and extracellular matrix formation that was confirmed by IF detection of type II collagen and elastin, the main constituents of elastic cartilage. Expression of elastic cartilage molecular markers during in vitro expansion and during culture onto hydrogels allowed confirming auricular chondrocyte phenotype. In vivo assay of tissue formation revealed generation of neotissues with similar physical characteristics and protein composition to those found in elastic cartilage. According to our results, biocompatibility of the CS-PVA-ECH hydrogel makes it a suitable scaffold for tissue engineering application aimed to elastic cartilage regeneration.

La ingeniería de tejidos (TE) es una alternativa para la reconstrucción auricular basada en la combinación de células, señales moleculares y biomateriales. Los andamios fabricados con biomateriales brindan un soporte estructural que favorece la adhesión cellular y el desarrollo del tejido. Un andamio debe poseer características como biocompatibilidad y bioactividad para soportar adecuadamente funciones celulares. Nuestro objetivo fue evaluar la biocompatibilidad de condrocitos auriculares de microtia cultivados sobre un hidrogel a base de quitosano-alcohol polivinílico-epiclorhidrina (CS-PVA-ECH) y proponerlo como andamio con aplicaciones en ingeniería de tejidos. La viabilidad de los condrocitos auriculares es superior al 81% después de ser cultivados sobre el hidrogel. El análisis por SEM reveló la unión celular y formación de matriz extracellular sobre el hidrogel; confirmada mediante detección por IF de colágena tipo II y elastina. La expresión de marcadores moleculares durante la expansión in vitro y el cultivo sobre los hidrogeles confirmaron el fenotipo condral. El ensayo de formación de tejido in vivo demostró la generación de neotejidos con características físicas y composición similar al cartílago elástico. Nuestros resultados indican que la biocompatibilidad del hidrogel de CS-PVA-ECH lo hace un andamio adecuado para aplicaciones en ingeniería de tejidos enfocadas a regeneración de cartílago elástico.

Biocompatibilidad de células madres mesenquimales de tejido gingival humano en cultivoconun andamiaje de polímero sintético de ácido poliláctico (OPLA) / Biocompatibility of mesenchymal stem cells derived from human gingival tissue in culture with a scaffold of a synthetic polymer open porosity polylactic acid polymer (OPLA)

La ingeniería tisular se plantea como tratamiento ideal para la regeneración de tejidos con la utilización de andamiajes, células madres y factores de crecimiento. Las células madres de origen gingival plantean ventajas de obtención, mientras que el OPLA 3D permite cultivos de alta densidad celular. El objetivo de esta investigación fue evaluar la biocompatibilidad de células madres de origen gingival en OPLA. Las células se obtuvieron de tejido gingival y fueron caracterizadas fenotípica y funcionalmente. La biocompatibilidad se evaluó mediante la proliferación celular, prueba de viabilidad con azul tripán y diferenciación celular a linaje condrogénico y osteogénico. El recultivo del constructo se utilizó para evaluar la capacidad de transporte. Las células al interior del OPLA se visualizaron mediante cortes teñidos con H-E. Las células madres mesenquimales en OPLA proliferaron, 80% de confluencia a la cuarta semana. La viabilidad celular en OPLA fue de 83,32%. En el recultivo, las células comienzan a proliferar a la semana. El OPLA permite la diferenciación celular a linaje condrogénico y osteogénico. Se observan células al interior del OPLA, permite la proliferación, viabilidad y diferenciación celular. El OPLA podría ser utilizado como andamiaje celular para la ingeniería de tejidos.

Tissue engineering arises as the ideal treatment for tissue regeneration with the use of scaffolds, stem cells and growth factors. Stem cells derived from gingival tissue present benefits in its objection. 3D OPLA allow high cell density cultures. The objective of this study was to evaluate the biocompatibility of gingival stem cells in OPLA. Cells were obtained from gingival tissue and were characterized phenotypically and functionally. The biocompatibility was evaluated through cell proliferation, viability test with trypan blue and cell differentiation to chondrogenic and osteogenic lineage. Recultivation of the construct was used to evaluate transportability. Cells inside OPLA were visualized by stained sections with H&E. Mesenchymal stem cells proliferated in OPLA, 80% confluence at the fourth week. Cell viability in OPLA was 83.32%. In recultivation, cells start proliferating in a week. OPLA allows cell differentiation to chondrogenic and osteogenic lineage. Cells were observed within OPLA. In conclusion OPLA allows proliferation, viability and cell differentiation. OPLA could be used as scaffolds for cells in tissue engineering.

Biocompatibilidad de un ionómero vítreo modificado con resina implantado en el tejido celular subcutáneo de la rata / Biocompatibility of a resin-modified glass ionomer cement implanted in the subcutaneous connective tissue of the rat

Objetivo: analizar la respuesta del tejido celular subcutáneo de la rata ante la implantación de un ionómero vítreo modificado con resinas. Materiales y métodos: se implantaron en el tejido celular subcutráneo de 15 ratas, tubos de silicona obturados a ras, con Fuji PLUS (FLP), un cemento de ionómero vítreo modificado con resinas, o EndoFill (EFL), un sellador endodóntico a base de óxido de cinc y eugenol, considerando este último como control positivo. Las paredes laterales de los tubos (PLT) fueron utilizadas como control negativo. Luego de 0, 30 y 90 días postimplantación, los implantes, juntamente con los tejidos circundantes, fueron removidos, fijados en solución de dormol al 10 por ciento y, finalmente, procesados para su estudio histológico. Resultados: el análisis histológico demostró que, en todos los casos y en todos los períodos experimentales, el contacto directo con FPL y EFL produjo una reacción inflamatoria severa compuesta por polimorfonucleares neutrófilos, linfocitos,plasmocitos, macrófagos y vasos de neoformación. Se observaron numerosas partículas de FPL y EFL dispersas en todos los tejidos, muchas de ellas fagocitadas por macrófagos yc éluals gigantes multinucleadas, o dentro de la luz de los vasos sanguíneos. A los 10 días posimplantación, la reacción de los tejidos en contacto con PLT fue considerara mínima, pero éstos retornaron a la normalidad luego de 30 y 90 días. En todos los períodos estudiados no se hallaron diferencias significativas (P>0,05) entre FPL y EFL, pero sí las hubo entre estos materiales y los PLT (P<0,05). Conclusión: los resultados demostraron que, luego de 90 días, tanto FPL como EFL provocaron reacciones severas en el tejido celular subcutáneo de la rata. Si bien los materiales analizados no fueron originariamente desarrollados para ser utilizados en contacto directo con la pulpa, la reacción inflamatoria y la intensa actividad macrofágica provocada por la progresiva degradación de éstos sugiere

Evaluación del comportamiento biológico de tres cementos / Biocompatibility of endodontic sealers

El objetivo de este estudio fue evaluar el comportamiento biológico de los cementos endodónticos Endofill, Endomethasone y Sealer 26, en tejido conjuntivo subcutáneo de ratones. Fueron establecidos tres grupos experimentales y un grupo control de cinco animales cada uno, en los períodos de 7, 21 y 60 días. Los cortes histológicos obtenidos fueron coloreados con Hematoxilina & Eosina y con tricrómico de Masson, para posteriormente ser evaluadas la reacción inflamatoria adyacente y la formación de tejido fibroso. Los datos obtenidos fueron sometidos al test estadístico de Kruskall-Wallis y Miller con 5% de nivel de significancia. El análisis microscópico mostró reacción inflamatoria más intensa en los períodos de 7 y 21días. A los 60 días hubo formación de una cápsula fibrosa densa para el cemento Endomethasone y parcialmente densa para los demás cementos. El análisis estadístico mostró diferencia estadísticamente significativa con mayor intensidad de reacción inflamatoria solamente para el grupo II (Endofill) en el período de 60 días en relación a los grupos I (control) y grupo III (Endomethasone). Todos los materiales presentaron reacción inflamatoria más intensa en los períodos inicial e intermediario, siendo que la Endomethasone presentó los mejores resultados.

The aim of this study was to evaluate the biological behavior of the root canal filling sealers: Endofill, Endomethasone and Sealer 26 when in contact with the subcutaneous connective tissue of rat. For the study one control and three experimental groups were used. A total of 15 animals were divided into 5 for each period: 7, 21, and 60 days. The obtained histological sections were processed and stained using the hematoxiline & eosine technique. The histological sections were subjective and comparatively analyzed using optic microscopy. The intensity of the inflammatory reaction and the level of fibrosis of the tissue were registered. The results were registered in scores and statistical analysis by KRUSKAL-WALLIS p<0,05 and MILLER methods. The statistical analysis revealed that in the period of 60 days, there was statistical significance to group II (Endofill) between group (control) and III (Endomethasone) with mononuclear cells into connective tissue. All materials promoted inflammatory reaction more intense at 7 and 21 days with the Endomethasone showing the best results.